篇一:植物组织培养实习范文
一、前言
(1)植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。该技术能应用于植物离体快繁、无病毒苗木培育、培育新品种或创制新物种、次生代谢产物生产、植物种质资源的离体保存、人工种子等。而组织培养的实习能够将课本中所学的理论知识应用于实践,开拓我们的视野,扩大我们的知识面,对于提高我们的探究意识和创新、动手操作能力具有很重要的意义。
(2)植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础,是指每一个植物细胞带有该植物的全部遗传信息,在适当的条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株。
(3)茅膏菜具有较大的药用价值和研究价值但种子萌发率低,因此可利用种子繁殖获得无菌苗后在进行快繁。
二、实习项目
茅膏菜的组织培养
三、实习目的
(1)复习、巩固和植物组织培养的基本理论和基本知识,同时进一步丰富所学知识;
(2)了解茅膏菜的形态、习性、种类、用途的多样性以及它们与环境的关系,激发学习的积极性;
(3)理论联系实际,通过自主学习和研究性学习培养独立工作能力和创新意识;
(4)重点掌握茅膏菜组织培养的基本操作技术及方法;
四、实习时间安排:
(1)2012-11-18、2012-11-24、2012-11-25在图书馆查阅茅膏菜及组织培养的相关资料;
(2)2012-12-1至2012-12-2去奇正藏药厂药材种植基地参观,采集茅膏菜种子;
(3)2012-12-8至2012-12-13在植物组织培养实验室进行茅膏菜的快速繁殖实验;
(4)2012-12-14至2012-12-16撰写实习报告;
五、实习地点
(1)西藏农牧学院图书馆、电子阅览室
(2)奇正藏药厂药材种植基地(奇正藏药厂药材种植基地位于西藏林芝地区,全地区海拔500至7800多米,特殊的地形和气候,使这里各种物种资源十分丰富,而且没有受过污染。该种植基地目前已成功种植西藏高山红牡丹、茅膏菜、波棱瓜、翼首草、独一味、藏麻黄等多种药用植物)
(3)西藏农牧学院植物组织培养实验室(植物组织培养实验室具有进行该项技术的完整设备和条件 ,便于进行茅膏菜的组织培养)
六、实习材料及工具:自封袋 、采集箱 、三角纸袋 、高压灭菌锅、超净工作台、烧杯、镊子、剪刀、培养皿、三角瓶、酒精灯 、医用
脱脂棉、培养架、医用小推车、蛭石、河沙、园土、泥炭土、育苗盘、喷雾器、配制MS培养基所需母液、75%酒精、70%酒精、0.1%升汞、NAA、6-BA、甲醛、高锰酸钾、0.1%多菌灵、活性炭、茅膏菜种子
七、实习内容
(1)查阅资料
借助图书馆,电子阅览室查阅关于茅膏菜的生长习性,和其组织培养相关知识为实习提供技术支撑。
茅膏菜:【别名】石龙芽草、山胡椒、胡椒草、夏无踪、白花叶、黄金丝、滴水不干、山地皮、捕虫草、食虫草、柔鱼草、苍蝇草、捕蝇草、苍蝇网、珍珠草、露珠草、无风自动草。为茅膏菜科植物茅膏菜或光萼茅膏菜的全草。多年生草本,直立或有时呈攀援状,高9-32cm,有紫红色汁液。鳞茎状球茎紫色,直径约6mm。基生叶密集成近一轮或最上几片着生于节间伸长的茎上;退化基生叶线状钻形,长约2mm;不退化基生叶圆形或扁圆形,花时枯凋;茎生叶互生,盾状,半月形或半圆形,长2-3mm,边缘或叶上面有多数头状腺毛,分泌粘液,形成露珠状。茅膏菜属植物叶面密被分泌黏液的腺毛,当昆虫停落在叶面时,即被黏液粘住,而腺毛又极敏感,有物触及,便会向内和向下运动,将昆虫紧压于叶面。当昆虫逐渐被腺毛分泌的蛋白质分解酶所消化后,腺毛重新张开再次分泌黏液,故能常在叶片上见到昆虫的躯壳。这类植物本身有叶绿素,可以进行光合作用,但根系极不发达,因此靠捕食昆虫就能弥补其氮素养分的不足。
该植物全草含矶松素、茅膏醌、羟萘醌、氢化萘醌等多种醌类成分。腺毛分泌物含类似胰酶的蛋白酶。可用于治疗疮毒、瘰病。治胃痛,赤白痢,小儿疳积,跌打损伤。
生态环境:1.生于海拔1200-3650m的山坡潮湿地的松林下、草丛中或溪沟边。⒉生于山坡、溪边草丛、灌丛和疏林下。 分布:⒈分布于四川、贵州、云南和西藏。⒉分布于江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。
茅膏菜萌发培养基为:1/2MS培养基(pH=5.8),增殖培养基为1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1,生根培养基为1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2
(2)采集茅膏菜种子
采集地点:奇正藏药厂药材种植基地
采集时间:2012-12-1上午
(3)培养基的配制
按照MS培养基的扩大倍数配制所需培养基,待完全溶解后导入三角瓶中,用封口膜封好,放入高压灭菌锅中121℃,灭菌20min后取出培养基冷却至凝固。
(4)茅膏菜无菌苗的获得
先打开超净工作台上的紫外灯,用紫外线灭菌30min,然后将其关闭。
第一步:用滤纸将茅膏菜的种子包好,并用绳子进行捆扎。 第二步:先打开超净工作台上的紫外灯,用紫外线灭菌30min,
然后将其关闭。 第三步:用自来水清洗双手后,在超净工作台上点燃酒精灯后将双手及小臂用75%酒精擦拭。将捆扎好的种子用70%酒精消毒30s,然后用无菌水冲洗2-3次。
第四步:用0.1%的升汞将种子消毒12min,然后用无菌水冲洗5-6次。 第五步:用镊子将绳子解开,将种子放入垫有滤纸的培养皿中吸取种子表面的液体。然后将种子点接在1/2MS培养基(pH=5.8)表面。 第六步:将接种好的种子封好,放置在培养架上光照3000-4000LX,室温培养,30d。
(2)茅膏菜的增殖培养
将茅膏菜萌发出的无菌苗在超净工作台上剪去根,接种到增殖培养基1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1,放置培养架上室温,光照3000-4000LX培养40d。
(5)茅膏菜的生根培养
增殖40d后,把茅膏菜适当高度的芽(3-4cm)在超净工作台上接种到1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2,进行生根培养,并观察记录生根率。结果:生根率为85%。
(6)生根苗的驯化
将培养瓶放在温室自然光照下培养,同时昼夜有明显温差,5-7d后再打开封口膜使瓶中温度降低,通气加强,2-3d后可移苗。
(7)生根苗的移栽
第一步:移栽基质的准备。将河沙:园土:泥炭土:(1:1:2)
和蛭石搅拌均匀。用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸消毒并密封,3d后打开取出基质在阳光下暴晒,再装入育苗盘中。
第二步:幼苗出瓶后,先洗去粘附的培养基,用0.1%多菌灵溶液浸泡后移栽于基质中,种植密度为2-3cm×4-6cm。移栽完后一次性浇透水,并用0.1%多菌灵喷雾。当叶表面水珠消失后盖好保温薄膜,保持温度15-25℃,湿度在85%以上,同时注意通风,控制光照50%左右,每7-10d喷一次杀菌剂。
第三步:待小苗成活并长新,稍后可施稀薄的MS培养液作追肥,逐渐增强通风直至约2周后打开保湿薄膜即可,并统计移栽成活率。结果:移栽成活率为30%。
由此看出,茅膏菜移栽成活率较低,其原因分析有以下几点:(1)当前温度较低不利于茅膏菜的移栽(2)幼苗水分供需不平衡(3)试管苗老化(4)移栽过程中微生物感染(4)试管苗的健壮性差(5)过渡培养的环境条件不利于试管苗的生长
八、实习心得
(1)通过本次实习让我了解了更多关于茅膏菜的知识,基本掌握了进行茅膏菜组织培养的内容、步骤以及应该注意的问题,开拓了我的视野,在一定程度上提高了我的动手实践能力和操作技能。同时也让我对课本专业知识理解的更加深刻。
(2)实习中我也掌握了超净工作台、高压灭菌锅等仪器的使用及注意事项,同时也掌握了配制培养基的方法。
(3)通过去奇正藏药厂药材种植基地采集种子和管理员的介绍我学
到了关于独一味、翼首草、藏麻黄等藏药材知识,丰富了我的知识面,增进了我对藏药材的理解,提高了我对本专业的学习兴趣和探究意识。
(4)这次实习也增进了我们班级同学之间的了解,加强了我们同学和老师之间的友谊,增强了班级的团结力和凝聚力 。
(5)本次实习给了我们一次接近大自然的机会让我感受到自然之伟大,她留给我们如此多的宝贵财富,等待我们去发掘,去保护,去利用,我们再开发其研究价值的同时更应该懂得怎样以小代价换取大创造。
篇二:植物组织培养实习生实习心得
本次实习,我接触到向往已久的组织培养技术,原本认为很高大上的技术,在老师的细心指导下也逐渐掌握要领。这次,我们进行了麻竹初代繁殖体系的建立和容器苗的移植两项重要的工作。实验的过程很繁琐,每一步都至关重要,每一步都需要我们付出十二分的细心和耐心才能获得最后的成功。
在配置培养基时,需要加入的母液种类繁多,我们的细心远远不够,每加入一种母液就核对一种母液的细心制度让我们深深折服。另外,培养基的灭菌至关重要,这决定了之后工作的绝对成败。通过,配置培养基这一基本但是至关重要的工作,我们学会了付出细心,用耐心收获成果。
另外,理论与实践是不可分割的,在理论学习的同时,我们还需要认真的进行实验。在现代农业中,组织培养有着极其重要的作用,因此更需要我们在实验中认真的学习组培的技术。 根据细胞的全能性原理以及组培原理将离体的植物器官原生质体培养在人工配制的培养基中,给与适当的条件,使其长成人类所需要的组织、器官和完整的植株的过程。而自然下的植株是含有病毒的,这样会导致经济作物大量减产,为了克服这一困难在组织培养前对外植体进行脱毒,这不仅克服了经济作物的减产还提高了产量,大大提高了经济效益。并切植物组织培养实现了高价植物种类的工厂化生产,为这些紧缺植物和植物体内各物质特别是次生代谢物的提取提供了更多的材料。
在本次实验中,我发现自身在做实验时还存在很多的不足,在理论知识方面也有很多的欠缺。这就要求我在以后的学习中,更加努力认真。同时也感谢团队同学的包容与互助以及老师的指导和教导。
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