乳中抗生素的残留的测定 中图分类号：S816.73文献标识码：A 文章编号： 近20年来，兽药（包括药物添加剂）在畜牧业中的应用日益广泛，其在降低家畜发病率与死亡率、促生长、提高饲料利用率和改善产品品质方面的作用是十分显著的，已成为现代畜牧业不可或缺的物质基础。牛乳与人们的生活息息相关，因此牛乳中的抗生素残留问题一直是各国政府和食品安全机构关心的重点，中国近年来对牛乳中的抗生素残留问题也逐渐予以关注。 1.1 牛乳中抗生素残留的原因 青霉素、阿莫西林、氨苄西林等抗生素在奶牛养殖业中常用于治疗奶牛乳房炎和子宫内膜炎，由于其廉价和广谱的抗菌性而被大量且频繁地超剂量使用，因此导致了牛乳中高浓度抗生素残留。牛乳中抗生素残留的原因主要是：非治疗目的用药、治疗目的用药和非法人为掺杂非治疗目用药的主要指在牛饲料中添加含有一定比例的抗生素的饲料添加剂，在饲料中添加抗生素的主要作用是：杀灭或抑制畜体内(特别是消化道内)的有害微生物，调节畜体胃肠道微生态平衡，从而改善动物健康，促进动物生长，达到预防奶牛疾病和使其生产力提高的目的。这也是造成牛乳中抗生素残留的一个非常重要的一个原因如果在治疗后停止用奶时间不够，可能导致牛乳中抗生素残留超标美国食品和药品管理局（FDA）调查表明，用药不当是导致牛乳中抗生素残留的主要原因。 1.2 牛乳中抗生素残留的危害 对于食品中药物残留是否引起严重后果仍有争议，特别是对药物残留的长期影响还不清楚，但是对于牛乳中抗生素残留引起的以下几点危害目前还是可以肯定的。 1.2.1 对人类健康的危害 如果含有致敏抗生素的牛乳被敏感人群饮用，可引起食用者过敏反应，表现的症状轻则是皮疹、发热、关节疼痛，严重时可发生过敏性休克甚至危及生命。曾报道，英国一对青霉素高度敏感的病人，使用约10IU/mL的青霉素的商品牛乳后，发生了变态反应。 链霉素可引起肾损害和听觉神经受损，四环素引起肝损害，其与骨骼、牙齿中的钙质结合，产生骨及牙齿感染，还可影响儿童的生长发育。美国食品药品管理总局（FDA）规定氯霉素在兽医上，仅能用非食品动物，而不能用于食品动物，但目前我国尚无此规定。 抗生素残留会抑制甚至杀死人体肠道内正常敏感菌群的生长，当有重大疾病需要治疗时抗菌药物失效，使肌体易发感染性疾病，给临床治疗带来不可估 量的麻烦。 1.2.2 对乳品加工危害 从原料乳的收购上来说，细菌含量是对牛乳定级的一个重要指标，而抗生素的存在会抑制牛乳中细菌的正常繁殖，因此牛乳中是否含有抗生素，会造成收奶人员对牛乳质量的误判，以优质奶的价格收购次级奶，给企业的经济利益造成影响。从乳制品加工角度来看，原料乳中抗生素残留物严重干扰发酵乳制品的生产，抗生素可严重影响干酪、黄油、发酵乳的起酵和后期风味的形成。 1.3 牛乳中抗生素残留现状和研究进展 1996年，FDA曾对4 480 530个奶样中β-内酰胺类药物的残留情况进行了调查，结果发现其中6148个样品（0.14％）呈阳性结果，主要品种是苄青霉素、头孢匹林、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素和邻氯青霉素。 我国1990年11月颁布的乳与乳制品管理办法第四条明确规定，乳牛在应用抗生素期间和停药后5d内的乳汁不得供食用。牛乳中抗生素残留的检测方法主要有：微生物受阻检测法、理化检测法、免疫学分析法。 1.4 最大残留限制的规定 根据WHO和FDA提供的数据，欧盟药典确定了牛乳中β-内酰胺类抗生素的MRLs值为：青霉素G4μg/kg、氨苄西林4μg/kg、羟氨苄青霉素4μg/kg、苯唑青霉素30μg/kg、头孢氨苄100μg/kg、头孢吡啉60μg/kg。 2 研究方法 2.1试验用无抗牛乳的配制 无抗牛乳：由无抗全脂奶粉复原而成，浓度为10％（W/V），并用TTC法（trepheye tetrazolium chloride）检测以确定其是无抗生素残留牛乳样品。 （1）TTC水溶液配制（4％）[1]（孟昭赫，1990） 称取1gTTC，溶于25mL灭菌蒸馏水中，装褐色瓶内于4～10℃冰箱保存，如超过一个月或变成褐色、黄色均废弃。 （2）青霉素（penicillin）溶液的配制 称取青霉素国际标准品1mg，用蒸馏水配制成浓度为1mg/L的溶液。本试验用的抗生素是青霉素（160万单位），质量浓度1mg/L,效价1690单位/mg。 2.2 研究内容 2.2.1 加入嗜热链球菌活力的测定 用平皿计数法测定嗜热链球菌的活力，选择大于106/ml。 2.2.2 嗜热链球菌加入量的确定 本试验中加入嗜热链球菌量用单因素法确定接种的量。 2.2.3 pH计法检测抗生素残留方法的研究 在没有抗生素存在的条件下，乳酸菌会正常繁殖，不受影响，pH值也会发生正常的变化。 2.2.4 TTC法与pH计法检验抗生素效果的比较 按照GB4789.27-94操作，在同样时间内，观察TTC法与pH计法检测抗生素残留结果的明显程度，进行比较。其原理是：当乳中加入嗜热链球菌后，如乳中无抗生素，嗜热链球菌就生长繁殖，在新陈代谢中进行生物氧化，其中脱出的氢可以和加在乳中的氧化型TTC结合而成为还原型TTC，氧化型TTC是无色的，还原型TTC是红色，所以可使乳变红色。 3结论 本试验建立的检测方法与TTC法（GB4789.27-94）比较，得出二者具有一致性，而且可以得出120min 时pH值在5.7以上为阳性，在5.6以下为阴性，5.6～5.7之间为假阴性。从检测限上比较，pH计法能够检测青霉素的残留，检测限符合国际标准1.0×MRL，而TTC法检测青霉素残留的检测限已不符合国际标准；从检测时间上比较，TTC法检测时间至少3.5h，而pH计法检测时间为2.5h。pH计法的实际应用情况也验证了此方法优于TTC法，又由于pH计法的检测成本不高，因此比TTC法更适合于国内乳粉中青霉素残留的检测。 参考文献 [1]孟昭赫,食品卫生检验方法注释（微生物学部分）,1996,人民卫生出版社,北京. [2]席磊,田士玲,王永芬,牛奶中抗生素残留的原因分析与控制,2003.23(1),101-103 [3]许明贞,马林,方培生,李锦光,广州市牛奶中抗生素残留的现状分析,中国食品卫生杂质,1999,14(3),30-33. [4]马兆瑞,祝战斌,卡尔·莱金特,乳和乳制品中残留抗生素的检测方法,中国乳品工业,2003,31(4),37-40. 曾晓燕（1970-），女，食品工程师，从事乳品生产和检验方面工作。 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/8b0e38ee8aeb172ded630b1c59eef8c75fbf951f.html