淀粉测定方法

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淀粉的测定方法(1



测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法) 一、酶水解法 1。原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。 2。适用范围

GB50099-85,适用于所有含淀粉的食物。 3.仪器

1) 回流冷凝器 2 水浴锅 4。试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯. 1) 乙醚

2 0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司, EC321.1)05 g,100 ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。)

3 碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入13 g碘,溶解后加水稀释至100 ml 4) 85 %乙醇。

5 其余试剂同《蔗糖测定方法》 5.操作方法 5.1 样品处理

称取25 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖)将残留物移入250 ml烧杯内,并用50 ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20 ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1 h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250 ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250 ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1 h,冷后加2滴甲基红指示剂,5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100 ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 5.2 测定

按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。

6.计算

A1A2

×0.9

X1= ×100 ……………(1)

V1 V3

m1× × ×1000

V2 100



式中: X1——样品中淀粉的含量,%; A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg A2--试剂空白中还原糖的含量,mg

09-—还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数; m1-称取样品质量,g

V1-水解用样品溶液体积,ml V2-样品定容总体积,ml

V3——测定用样品处理液的体积,ml



二、酸水解法 1.原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,折算成淀粉。 2.适用范围

本法适用于含淀粉的食物 3.仪器




1 水浴锅。

2 高速组织捣碎机:1200 rpm 3 皂化装置并附250 ml锥形瓶. 4。试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 1 乙醚。

(2) 85%乙醇溶液。

(3 6mol/L盐酸溶液。

4 10mol/L氢氧化钠溶液。 5) 25mol/L氢氧化钠溶液。

6 甲基红指示液:02 %乙醇溶液. (7 精密pH试纸。

8 20 乙酸铅溶液, 9 10 % 硫酸钠溶液。

10 其余试剂同还原糖的测定。 5.操作方法 5.1样品处理

5.11粮食、豆类、糕点、饼干等较干燥的样品:称取2050 g磨碎过40目筛的样品,置于放有慢速滤纸的漏斗中,30 ml乙醚分三次洗去样品中脂肪,弃去乙醚。再用150 ml 85 %乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液,以100 ml水洗涤漏斗中残渣并转移至250ml锥形瓶中,加入30 ml 6 mol/L盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回2 h.回流完毕后,立即置流水中冷却。待样品水解冷却后,加入2滴甲基红指示剂,先以40 %氢氧化钠溶液调至黄色,6 mol/L盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深,可用精密pH试纸测试,使样品水解液的pH约为7。然后20 ml 20 %乙酸铅溶液,摇匀,放置10 min。再加20 ml 10 %硫酸钠溶液,以除去过量的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转500 ml容量瓶中,用水洗涤锥形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀释至刻度。过滤,弃去初滤液20 ml,滤液供测定用. 5.12蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品:11加水在组织捣碎机种捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、凉干,取可食部分)。称取5~10 g匀浆(液体样品可直接量取),250 ml锥形瓶中,30 ml乙醚振摇提取(除去样品中脂肪),用滤液过滤去除乙醚,再用30 ml乙醚淋洗两次,弃去乙醚。以下按51.1自”再用150 ml 85%乙醇溶液”起依法操作。 5.2 测定

按还原糖的测定步骤操作。 6.计算

(A3-A4)×09

X2 =

50

m2× ×

250



V2

×

1000

×100……………(1)

100



式中: X2-—样品中淀粉的含量,% A3——测定用样品中还原糖的含量.mg A4--试剂空白中还原糖的含量,mg m2——称取样品质量,g

V2-—测定用样品处理液的体积,ml. 500——样品液总体积,ml

09——还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;

(注:酸水解能分解部分半纤维素,形成具有还原力的单糖,如木糖、阿拉伯糖等,可影响分析结果。为了比较正确地测定食物中淀粉含量,建议采用淀粉酶糖化淀粉, 除去不可溶性的残渣后,再用酸水解使之成为葡萄糖,然后测定其含量,最后换算成淀粉.

三、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法) 1。原理

样品先在37℃下经α-淀粉酶水解,使可消化淀粉转化成葡萄糖,用80%乙醇提取,未水解的抗性淀粉部分经沸水浴凝胶化后,在淀粉葡萄糖苷酶转化成葡萄糖,用葡萄糖氧化酶法分别测定葡萄糖含量,再换算成可消化淀粉和抗性淀粉含量。 2。适用范围

参考EnglystChamp的方法.适用于所有含淀粉食物的测定。 3.仪器

(1 恒温水浴箱


本文来源:https://www.wddqw.com/doc/2635f048c9aedd3383c4bb4cf7ec4afe04a1b18f.html