竹叶总黄酮的提取和测定 实验目的： 1. 了解总黄酮类化合物的一般制备实验原理及方法 2. 掌握总黄酮类化合物的制备方法和测定方法 3. 培养验证和解决某一实际问题的能力和创新意识 实验原理： 1． 竹叶中含有大量总黄酮化合物，竹叶中黄酮类物质的相对极性决定了竹叶中含有的大量黄酮类物质可用较大极性的溶剂（乙醇）提取。 材料和用品： 1. 药品 竹叶、芦丁标准品、75%乙醇﹑70%乙醇、60%乙醇、5%亚硝酸钠、10%的硝酸铝溶液、l mol/ L 氢氧化钠溶液 2 仪器 粉碎机、60目筛、恒温水浴锅、真空干燥箱、紫外—分光光度计、50ml容量瓶、10ml容量瓶、电子天平、滤纸、漏斗、烧杯、量筒、玻璃棒 方法与步骤： 1 总黄酮提取 ⑴ 将竹叶干燥粉碎过60目筛。 ⑵ 称取50g竹叶粉三份，分别加入体积分数75%的乙醇500ml、1000ml、1500ml. ⑶ 70℃水浴提取1.5h后过滤取滤液。 ⑷ 将三份滤液混合后水浴蒸发浓缩（温度不宜过高）待乙醇蒸发完后，将浓缩液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体，粉碎得终产物。 ⑸称量计算产率。 2 总黄酮的测定 ⑴ 标准液的配制 精确称取芦丁标准品10mg,置于50ml容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴微热使溶，放冷，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀即得0.2g/L的标准溶液。 ⑵ 标准曲线制作 精密吸取标准液0.0﹑1.0﹑2.0﹑3.0﹑4.0﹑5.0ml,分别置于10ml容量瓶中，各加60%乙醇溶液使成7ml，精密加入5%亚硝酸钠0.3ml，摇匀，放置6min,精密加入10%的硝酸铝溶液0.3ml，摇匀, 放置10 min, 加入l mol/ L 氢氧化钠溶液2 mL. 分别用60%乙醇稀释至刻度, 摇匀,放置10 min ， 在510 nm 处测吸光度, 管号 0.2mg/ml芦丁标准液(ml) 5%亚硝酸钠(ml) 10%硝酸铝(ml) 1mol/l氢氧化钠(ml) 芦丁含量（mg） 1 0.0 0.3 0.3 2 0.0 2 1.0 0.3 0.3 2 0.2 3 2.0 0.3 0.3 2 0.4 4 3.0 0.3 0.3 2 0.6 5 4.0 0.3 0.3 2 0.8 6 5.0 0.3 0.3 2 1.0 OD510nm ⑶ 样品溶液配制 称取1.5g样品，置于50ml容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴微热使溶，放冷，用60%乙醇稀释至刻度。 ⑷ 样品溶液测定 精密吸取1.0ml样品液，置于10ml容量瓶中，各加60%乙醇溶液使成7ml，精密加入5%亚硝酸钠0.3ml，摇匀，放置6min,精密加入10%的硝酸铝溶液0.3ml，摇匀, 放置10 min, 加入l mol/ L 氢氧化钠溶 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/6c065f05a6c30c2259019e25.html