实验报告专用纸 实验一 刺激强度、频率对肌肉的影响 一、实验目的 1.掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备方法 2.观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点 3.观察组织反应与刺激强度之间的关系，从而掌握阈强度、阈刺激、最大刺激等概念，理解动作电位“全或无”的特点 4.观察不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响，从而了解强直收缩的机制 二、实验对象 蛙或蟾蜍 三、实验器材和药品 蛙类手术器械（蛙板、玻璃板、蛙钉、刺蛙针、粗剪刀、组织剪、眼科剪、镊子、玻璃分针、放污碟和棉线等），任氏液，烧杯，滴管，锌铜弓，双凹夹，铁架台，张力换能器，肌动器（肌槽），生物信号采集处理系统。 四、实验方法与步骤 1.破坏蛙脑和脊髓 取蛙一只用自来水洗净，一手握蛙，小指和无名指夹住两后肢，用拇指按压背部，中指放在胸腹部，用食指下压头部前端使头前俯，另一只手持刺蛙针沿枕骨正中线向脊柱端触划，当触到凹陷处即为枕骨大孔。刺蛙针可由此垂直刺入枕骨大孔，再折向前方插入颅腔并左右搅动，捣毁脑组织；而后退针至皮下，针尖向右刺入椎管并上下搅动以破坏脊髓。当蛙四肢松软、下颌呼吸消失、反射消失则表示其脑和脊髓被完全毁坏，否则应重复以上操作。 2.剪除躯干上部及内脏 在蛙骶髂关节水平以上1~2cm处用粗剪刀剪断脊柱，一手握双后肢，使蛙的头与内脏自然下垂，一手持粗剪刀，沿两侧将蛙的头、前肢和内脏全部剪除并置于放污碟内，仅保留蛙的双后肢、腰骶部脊柱及由它发出的坐骨神经丛（呈淡黄色）。 3.剥离皮肤 一手持镊子夹住蛙脊柱端（注意镊子不要触及神经），另一手捏住其上的皮肤边缘，向下剥掉蛙的皮肤，然后将标本放在盛有任氏液的烧杯中备用。将手及使用过的手术器械洗净，防止蛙皮肤的分泌物可能对神经肌肉组织造成影响 4.分离双后肢 用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，用粗剪刀剪去向上突出的骶尾骨（注意勿损伤坐骨神经），再沿正中线将脊柱分为两半，并从耻骨联合剪开双后肢，最后将分离的双后肢浸入盛有任氏液的烧杯中。 5.游离坐骨神经 取一侧后肢，腹面向上，用蛙钉将其固定在蛙板上，在大腿背侧的半膜肌与股二头肌之间用玻璃分针分离出坐骨神经。分离时要仔细用剪刀剪断坐骨神经的分支，向上分离至基部，向下分离至腘窝。保留与坐骨神经相连的一小块脊柱。 6.剔除肌肉，剪断股骨 将分离出来的坐骨神经搭在腓肠肌上，用组织剪从膝关节周围向上剪除大腿的所有肌肉，将膝关节上方的股骨刮干净，暴露股骨并在距膝关节上1cm处用粗剪刀剪断。 7.分离腓肠肌，完成标本 在腓肠肌跟腱处穿线结扎，提起结扎线，剪断结扎线后的跟腱，分离腓肠肌至膝关节处，在膝关节处将小腿除腓肠肌外的其余部分剪断，即制备出一个完整的坐骨神经-腓肠肌标本。 8.检查标本的兴奋性 将浸在任氏液的锌铜弓短暂接触坐骨神经，若腓肠肌发生收缩，则表示标本的兴奋性良好，可放入任氏液中备用。 9.实验装置及标本安放 将肌动器固定在铁架台的双凹夹上，并与张力换能器平行，然后把标本中预留的股骨固定在肌动器上，使肌肉处于自然拉长的长度；坐骨神经干放置在肌动器的刺激电极上，保持神经与刺激电极接触良好。将张力换能器与刺激电极分别连接生物信号采集与处理系统。 五、实验结果 刺激模式采用单刺激，逐步增大刺激幅度，找到刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强度）是0.10V，继续增加刺激强度，观察到肌肉收缩反应相应增大，找到刚能引起肌肉出现最大收缩的最小刺激强度（最大刺激强度）为0.25V。 选用最大刺激强度刺激，使刺激频率逐渐增加，依次记录得A:1V,H:1时为单收缩，A:1V,H:11时为不完全强直收缩，A:1V,H:41时为完全强直收缩。 六、实验讨论 本实验使用的标本蛙坐骨神经干是复合神经干，其中包括有许多根神经纤维，因此其与刺激强度的关系具有复合神经干的特点。由于组成神经干的神经纤维兴奋性不同，对于不同的强度的刺激，被兴奋而产生动作电位的神经纤维的数目就会不一样。保持足够的刺激时间不变，刚能引起其中兴奋性最高的神经纤维产生兴奋，并使其所支配的肌纤维发生收缩的刺激强度即为这些神经纤维的阈强度，具有此强度的刺激称为阈刺激。随着刺激强度的不断增加，有较多的神经纤维兴奋，肌肉的收缩幅度也逐渐增大。当神经中全部纤维均产生兴奋，此时肌肉做出最大的收缩幅度，再继续增加刺激强度，肌肉收缩幅度不再随之增大。将引起肌肉最大收缩幅度的最小强度的刺激称为最大刺激。 给神经肌肉标本一个或一连串的有效刺激，可使肌肉出现不同的收缩形式：如果刺激是一个或者是间隔时间大于肌肉收缩期与舒张期之和的一串刺激，可产生一个或一串互相分开的单收缩；当刺激频率增加，两个刺激的间隔时间缩短，如果刺激间隔时间大于收缩期而小于收缩期与舒张期之和时，则后一刺激引起的将落在前一刺激引起的收缩过程的舒张期内，肌肉收缩出现不完全的融合，即出现不完全强直收缩；如果刺激间隔时间小于收缩期时间，则后一刺激引起的收缩将落在前一刺激引起收缩期内，肌肉收缩出现完全的融合，即完全强直收缩。 七、实验结论 在阈上刺激的范围内，随着刺激强度增加，肌肉的收缩幅度增大，到肌肉做出最大的收缩幅度时，再继续增加刺激强度，肌肉幅度不再随之增大；不同的刺激频率，可使肌肉出现不同的收缩形式。 成绩： 教师签名：_____________ 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/0670e68e162ded630b1c59eef8c75fbfc67d944c.html