DNA复制过程示意图
知识拓展:选修3教材中,PCR技术中出现了引物,什么是引物?引物有什么作用?为什么DNA复制需要RNA引物,PCR技术中需要DNA引物即可?以下内容来自于《遗传学》(梁红主编)。
一、什么是引物?
引物是指在核苷酸聚合作用起始时,刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子。
引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。
存在有自然中生物的DNA复制引物是RNA引物,人工聚合酶链式反应(PCR))中人工合成的引物通常为DNA引物。
二、引物的作用
1.细胞内复制需要RNA引物
DNA的复制需要RNA引物,这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。
DNA聚合酶不能直接启动DNA新链的合成,即不能从头合成DNA,只能在有引物的3’-OH上聚合核苷酸来延伸DNA链。原因是在新链的延伸过程中,只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸,否则延伸终止,启动切除修复机制,直至添加正确的碱基,也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链(可以是RNA-DNA)才能继续下游DNA的合成,这是它的忠实性和高保真系统决定的。DNA的复制必须先借助于RNA聚合酶以DNA为模板合成一小段引物RNA,然后DNA聚合酶再接着进行DNA合成。最后,引物RNA由DNA聚合酶水解后,替换上相应的DNA片段,最后由DNA连接酶把片段完整连接起来。
而RNA聚合酶可以从头合成RNA,合成的RNA游离在模板外,不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。
2.PCR技术中需要DNA引物即可
PCR反应中所用到的DNA引物,是用化学法人工合成的,与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸;而在体内,由于DNA聚合酶的忠实性,不能从头合成DNA,因此只能采用RNA引物来延伸了。
链接:DNA的不连续复制特点和冈崎片段
本文来源:https://www.wddqw.com/doc/74cefbd316791711cc7931b765ce0508773275f0.html
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