摘要题目 (题目：宋体, 三号字, 加粗, 居左) 作者1 , 通讯作者2* (作者：宋体, 小四号字, 加粗) 1 部门1,单位1, 地址1,城市1,国家1; (单位地址：宋体, 五号字,斜体) 2部门2, 单位2, 地址2, ,城市2, 国家2. 摘要正文: 宋体，小四号字，行距20磅；其中，参考文献应用方括号和数字标注[1] 和[2,3] 关键词:宋体, 小四号字 致谢: 宋体, 小四号字, 单倍行距 参考文献: [1]姓名, 姓名 (年)文件名.杂志名, 卷期, 页码范围. (宋体， 小五号字, 单倍行距) [2]A.B. Smith, C.D. Brown (Year)File name. Journal, Vol, Initial page. 页面设置：A4纸张，距离上方 3 cm, 下方3 cm, 左方3 cm，右方3 cm 文件保存为 Word格式 *第一作者或通讯作者的E-mail： 构建“转录因子-启动子”耦联载体开展植物生物碱次生代谢工程 张磊1，陈万生2*12第二军医大学长征医院药学部 上海市凤阳路415号 200003 第二军医大学药学院生药学教研室 上海市国和路325号 200433 萜类吲哚生物碱(Terpenoid Indol Alkaloid, TIAs)是一大类有着重要药用价值的植物生物碱。夹竹桃科长春花（Catharanthus roseus）可以合成多达百余种TIAs，其中许多被广泛地作为药物应用。植物TIAs生物合成途径的研究已经相当深入。一种受茉莉酸甲酯诱导的植物转录调控因子ORCA3，通过调控初级和次级代谢途径中的关键酶基因的表达来调节TIAs合成。通过构建传统的35S启动子植物表达载体，分别对转录因子ORCA3和关键酶基因牻牛儿醇羟化酶(geraniol 10-hydroxylase, g10h)进行了单转和双基因共转化。结果显示在长春花中同时过量表达orca3和g10h不能取得最佳的含量提升效果。进一步通过基因融合(Gene fuse)技术，用带有甲基茉莉酸诱导响应元件（Jasmonate- and elicitor-responsive element, JERE）特异序列的异胡豆苷合成酶（strictosidine synthase, STR）启动子替换g10h野生型启动子，和ORCA3一起构成耦联植物表达载体转化长春花。实时定量PCR结果显示通过对g10h启动子的替换，ORCA3可以通过作用于JERE调控g10h的表达。转化发根中目标产物长春碱的含量为1.32 mg/g，是对照（0.33 mg/g）的4倍。阿玛碱的含量为0.87 mg/g，是对照（0.23 mg/g）的3.8倍。但是长春质碱的含量（0.19 mg/g）仅为对照（0.25 mg/g）的76%。 本项目着眼于真核生物基因的表达调控以及转录因子和启动子的相互作用，针对植物次生代谢途径中的关键酶基因的启动子序列进行结构改造，使其受特定的转录因子调控，为克服合成途径中的限速步骤，提高目标化合物的产量提供了新的思路。 关键词：代谢工程；基因修饰；转录因子；启动子；萜类吲哚生物碱 *Email:chenws@vnet.citiz.net 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/7ce0a230fc00bed5b9f3f90f76c66137ee064f34.html