DNA分子杂交技术及其原理

时间:2024-02-13 10:38:46 阅读: 最新文章 文档下载
说明:文章内容仅供预览,部分内容可能不全。下载后的文档,内容与下面显示的完全一致。下载之前请确认下面内容是否您想要的,是否完整无缺。


什么是DNA分子杂交技术?



给你做个比喻,希望对你理解有帮助。将宿主DNA(一般做克隆是有很多宿主DNA)比喻成很多还没装锁的,而你希望插入宿主DNA上(或替换掉一段序列)的目的基因比做是一把特定的,而这个基因探针就是能开那把锁唯一的钥匙。如果你能用钥匙打开某个,说明已经装上了。也就是说如果能检测到杂交信号,说明目的基因已经接到宿主DNA上了。

杂交的原理其实就是碱基互补配对。

至于怎么看出来是否杂交上,这个是要在探针上做标记(标记可以有很多种,生物的、荧光的、放射性的等等),杂交后是要洗脱的,只有这种特异性的杂交才被保留下来,再通过检测探针上的标记来看出是否杂交上。比如上面的钥匙,就像你用一串的钥匙去试,但你可以先在要的那个钥匙上做个标记,你不要认识钥匙的齿(这里的齿你可以想像成探针的序列),只要认识钥匙上的标记就行。

(这个比喻有点漏洞,就是原始的那些不管用不用钥匙都不能打开,但我暂时没想到其它比方)



什么是DNA分子杂交原理?



DNA分子杂交 DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。

DNA分子杂交的意义 :分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DNA链和小鼠DNA单链能形成杂交分子,而且只是部分碱基配对。但是,人与鼠之间的DNA 交分子的形成,比人与酵母之间DNA杂交分子的形成要容易。在生物进化过程中,DNA


的碱基序列也发生了变化。两种生物的DNA单链之间互补程度越高,通过分子杂交形成双螺旋片段的程度也就越高,二者的亲缘关系就越近;反之,亲缘关系就越远。所以,可以通DNA分子杂交技术来鉴定物种之间亲缘关系的远近。


本文来源:https://www.wddqw.com/doc/60634ec21ae8b8f67c1cfad6195f312b3069eb5e.html