[资料]mda和电导率的测定方法 测定小麦生理生化指标 丙二醛(MDA)含量的测定 一、实验用品 小麦样品、0.05mol/LpH7.8磷酸钠缓冲液;石英砂;5%三氯乙酸溶液(称5g三氯 乙酸用蒸馏水定容至100mL);0.5%硫代巴比妥酸溶液(称0.5g硫代巴比妥酸， 用5%三氯乙酸溶解，定容至100mL);分光光度计，离心机，水浴锅，天平，研 钵，5mL刻度离心管，10mL刻度离心管，镊子，5mL、2mL、1mL移液管，冰箱 二、实验内容与操作 (一) 丙二醛的提取 取0.5g样品，加入2mL预冷的0.05mol/LpH7.8磷酸钠缓冲液，加入少量石英砂， 在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5mL刻度离心管，将研钵用缓冲液洗净， 清洗液也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5mL。在4500r/min离心10min。上 清液即为丙二醛提取液。 (二) 丙二醛含量测定 吸取2mL的提取液于刻度管中，加入0.5%硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3mL， 于沸水浴上加热10min，迅速冷却后于4500r/min离心10min。以蒸馏水为空白调 透光率100%，测A532，A600。 (三) 结果计算 丙二醛含量[nmol/g(FW)]=[(A532-A600)×V1×V]/(1.55×0.1×W×V2) 式中:A532，A600—分别代表532和600nm波长下的吸光度值。 V—提取液总量(5mL) V1—反应液总量(4mL) V2—反应液中的提取液量(2mL) W—植物样品重量(0.5g) 1.55×0.1—丙二醛的微摩尔吸光系数 电导率的测定 【仪器与用具】电导率仪1台;真空泵(附真空干燥器)一套;恒温水浴1具;水浴试管架1个;20ml具塞刻度试管10支; 10ml移液管(或定量加液器)1个;试管架1个;铝锅1个;电炉1个;镊子1把;搪瓷盘1个;记号笔1支;去离子水适量;滤纸适量;塑 2料纱网(约3cm)6片。 【方法】1(容器的洗涤 电导法对水和容器的洁净度要求严格，水的电导值要求为1~2μS(微西门子);所用容器必须彻底清洗，再用去离子水冲净，倒置于洗净而垫有洁净滤纸的搪瓷盘中备用。为了检查试管是否洁净，可向试管中加入电导值在1,2μS的新制去离子水，用电导仪测定是否仍维持原电导。 3(测定(1)将小麦样品去离子水冲洗两次，再用洁净滤纸吸净表面水分。(2)在装有小麦的管中加入10ml的去离子水，并将大于试管口径的塑料纱网放入试管距离液面1cm处，以防止小麦在抽气时翻出试管。然后将试管放入真空干燥箱中用真空泵抽气20min(也可直 接将小麦放入注射器内，吸取10ml的去离子水，堵住注射器口进行抽气)。 (3)将试管置室温下保持1h，其间要多次摇动试管，或者将试管放在振荡器上振荡1h。 (4)1h后将试管充分摇匀，用电导仪测其初电导值(S)。 1 (5)测毕，将各试管盖塞封口，置沸水浴中10min，以杀死植物组织。取出试管后用自来水冷却至室温，并在室温下平衡10min，摇匀，测其终电导值(S)。2 4(计算 按下式计算相对电导度: S1 S2相对电导度(L)= 相对电导度的大小表示细胞膜受伤害的程度。 由于室温对照也有少量电解质外渗，故可按下式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗，称为伤害度(或伤害性外渗)。 L,LtCK，1001,LCK 伤害度(%)= 式中 L—首次实验测得的小麦相对电导度; t L—本次实验测得的小麦相对电导度。 ck 在电导度测定中一般应用去离子水，若制备困难可用普通蒸馏水代替，但需要设一空白试管(蒸馏水作空白)，测定样品时同时测定空白电导值，按下式计算相对电导度: S,空白电导度1 S,空白电导度2相对电导度(L)= 率，即为发芽率，发芽率越高的种子，出苗越全，不同作物的种子规定的发芽天数不同，小麦为7~8天，发芽率低于85,不能作种子。 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/4cec91437d21af45b307e87101f69e314332fa86.html