小麦3-磷酸-甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)上游序列的克隆及功能验证 张琳;邓荣;马兰兰;邓西平;陈鹏;杨淑慎 【期刊名称】《农业生物技术学报》 【年(卷),期】2014(022)008 【摘 要】3-磷酸-甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)广泛地存在于各种生物体内,是生物体内糖异生和糖酵解过程中的关键酶.为了获取长武134小麦(Triticum aestivum L.)GAPDH上游序列并分析其启动子活性,本研究根据小麦GAPDH基因(GenBank登录号:EF592180.1)5'端序列设计特异引物,利用基因组步移法获得了该基因上游1 071 bp的序列;对该序列进行结构分析表明,转录起始位点可能位于起始密码子上游约700 bp处;PlantCARE预测瞬时作用元件表明,在翻译起始密码子ATG的上游含有启动子基本结构元件TATA-box、CAAT框,以及能够应答脱落酸(abscisic acid,ABA)、干旱、低温等非生物胁迫逆境因子的多种顺式作用元件(如MYB、MYC、WRKY、ABRE、HSE和GT-1等);然后用GAPDH基因启动子序列替换植物表达载体pBI121 GUS基因前的CaMV 35S启动子,并构建启动子融合表达载体,并通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA 105介导转化烟草(Nicotiana tabacum)叶盘进行了瞬时表达分析,以GUS作为报告基因研究在ABA、干旱、低温3种非生物胁迫下启动子的活性.结果显示,ABA、低温和干旱对启动子有较明显的诱导效应,其中以干旱诱导最为显著.本研究通过基因组步移克隆得到GAPDH基因的启动子,分析表明此启动子为有着强启动活性的诱导型启动子. 【总页数】10页(P973-982) 【作 者】张琳;邓荣;马兰兰;邓西平;陈鹏;杨淑慎 【作者单位】西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100 【正文语种】中 文 【相关文献】 1.樟叶越桔甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因VdGAPDH1的cDNA克隆与序列分析 [J], 熊宏;陈海涛;宋健;赵平;刘小烛;丁勇 2.箭箸豌豆甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因片段的克隆及序列分析 [J], 张磊;刘志鹏;张吉宇;张妙青;王彦荣 3.粘虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因cDNA的克隆、序列分析及表达量检测 [J], 李柯;阴环;奚耕思;廉振民 4.斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆与序列分析 [J], 张津京;陈辉;冯志勇;陈明杰;汪虹 5.毛竹甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆与序列分析 [J], 杨洋;张智俊;罗淑萍 因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买 本文来源:https://www.wddqw.com/doc/b6c1fe66084c2e3f5727a5e9856a561253d3217f.html