小麦3-磷酸-甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)上游序列的克隆及功能验证

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小麦3-磷酸-甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)上游序列的克隆及

功能验证

张琳;邓荣;马兰兰;邓西平;陈鹏;杨淑慎

【期刊名称】《农业生物技术学报》 【年(),期】2014(022)008

【摘 要】3-磷酸-甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate

dehydrogenase,GAPDH)广泛地存在于各种生物体内,是生物体内糖异生和糖酵解过程中的关键酶.为了获取长武134小麦(Triticum aestivum L.)GAPDH上游序列并分析其启动子活性,本研究根据小麦GAPDH基因(GenBank登录

:EF592180.1)5'端序列设计特异引物,利用基因组步移法获得了该基因上游1 071 bp的序列;对该序列进行结构分析表明,转录起始位点可能位于起始密码子上游约700 bp;PlantCARE预测瞬时作用元件表明,在翻译起始密码子ATG的上游含有启动子基本结构元件TATA-boxCAAT,以及能够应答脱落酸(abscisic acid,ABA)、干旱、低温等非生物胁迫逆境因子的多种顺式作用元件(MYBMYCWRKYABREHSEGT-1);然后用GAPDH基因启动子序列替换植物表达载体pBI121 GUS基因前的CaMV 35S启动子,并构建启动子融合表达载体,并通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA 105介导转化烟草(Nicotiana tabacum)叶盘进行了瞬时表达分析,GUS作为报告基因研究在ABA、干旱、低3种非生物胁迫下启动子的活性.结果显示,ABA、低温和干旱对启动子有较明显的诱导效应,其中以干旱诱导最为显著.本研究通过基因组步移克隆得到GAPDH因的启动子,分析表明此启动子为有着强启动活性的诱导型启动子. 【总页数】10(P973-982)


【作 者】张琳;邓荣;马兰兰;邓西平;陈鹏;杨淑慎

【作者单位】西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,杨凌712100 【正文语种】 【相关文献】

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